Caracterizaci��n funcional de las prote��nas TasA y TapA en la formaci��n de fibras de tipo amiloide en Bacillus subtilis

Las prote��nas amiloides son un grupo heterog��neo de prote��nas diferentes en secuencia aminoac��dica, pero similares en su estructura cuaternaria: fibras enriquecidas en l��minas beta, con gran estabilidad, resistencia y capacidad de uni��n de colorantes espec��ficos, como el rojo congo o la thioflavina T. Estas prote��nas han estado tradicionalmente asociadas a patolog��as neurodegenerativas en humanos como el Alzheimer o el Parkinson. Sin embargo, los miembros dentro de esta familia est��n ampliamente distribuidas en la naturaleza, desde bacterias hasta humanos, e intervienen en un amplio rango de funciones biol��gicas, motivo por el que se han denominado ���amiloides funcionales���. En bacterias, los amiloides funcionales son responsables de participar en funciones muy diversas como la interacci��n c��lula-c��lula, con superficies abi��ticas, y formaci��n de biofilms. En Bacillus subtilis, la prote��na amiloide TasA es el componente proteico mayoritario de la matriz extracelular del biofilm de este microorganismo y el principal elemento que constituye las fibras amiloides, mientras que la prote��na auxiliar TapA, presente en mucha menor proporci��n, act��a favoreciendo el ensamblaje de las mismas. Estas act��an como un andamiaje proteico donde se disponen el resto de componentes de la matriz extracelular, lo que confiere a esta estructura una mayor estabilidad y, por consiguiente, proporcionan una mayor robustez al biofilm. En este este trabajo se pretende llevar a cabo el an��lisis de regiones o dominios tanto de TasA como de TapA importantes para la amiloidog��nesis, as�� como para la funcionalidad de ambas prote��nas. Para ello, el estudio se ha enfocado desde un punto de vista multidisciplinar, combinando pruebas cl��sicas de caracterizaci��n de amiloides con t��cnicas de biolog��a molecular y diversas pruebas biof��sicas. Los resultados obtenidos hasta la fecha han demostrado la existencia de peque��as secuencias, dentro de las prote��nas TasA o TapA con capacidad para polimerizar en la forma de fibras, lo que muestra su importancia en el proceso de fibrilaci��n y en la funcionalidad de ambas prote��nas. En el caso de la prote��na TapA, las regiones analizadas ponen de manifiesto la importancia de su extremo amino-terminal tanto en la funcionalidad de la prote��na como en su interacci��n con TasA.